Kao što nam i samo ime crtanog serijala i govori, glavnu uloge vode mačak Tom i miš Jerry. Naravno, nisu oni i jedini likovi ovog serijala, ali definitivno su u centru pažnje. Tom uzaludno pokušava Jerryja pretvoriti u slasnu večeru, no lukavi miš uspješno odolijeva svim mačjim klopkama i smicalicama. Cijeli crtani serijal svodi se na beskrajno rivalstvo mačke i miša. Ponekad im se pridruži i pas Kiler, koji uglavnom stane na Jerryjevu stranu, a na kraju svake epizode deblji kraj izvuče mačak Tom. U pojedinim epizodama Tom i Jerry iznenade svojim prijateljstvom koje je nastalo nakon godina i godina jurnjave. No, Tom se uvijek iznova vraća hvatanju Jerryja!
